1.概念:按照人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來,加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向地改造生物的遺傳性狀。
2.原理基因重組
3.工具:
A.基因的"剪刀":限制性內(nèi)切酶
①分布:主要在微生物中。
?、谧饔锰攸c(diǎn):特異性,即識(shí)別特定核苷酸序列,切割特定切點(diǎn)。
③結(jié)果:產(chǎn)生黏性未端(堿基互補(bǔ)配對(duì))。
B.基因的"針線":DNA連接酶
?、龠B接的部位:磷酸二酯鍵,不是氫鍵。
?、诮Y(jié)果:兩個(gè)相同的黏性未端的連接。
C.基因的"運(yùn)載工具":運(yùn)載體
?、僮饔茫簩⑼庠椿蛩腿胧荏w細(xì)胞。
?、诰邆涞臈l件:a、能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存。b、具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)。
c、有某些標(biāo)記基因。
?、鄯N類:質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒。
④質(zhì)粒的特點(diǎn):質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體。
4.基因操作的基本步驟:
?、偬崛∧康幕颍喝藗兯枰奶囟ɑ颍缛说囊葝u素基因、抗蟲基因、抗病基因、干擾素基因等
?、谀康幕蚺c運(yùn)載體結(jié)合(以質(zhì)粒為運(yùn)載體):用同一種限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒DNA(運(yùn)載體),使其產(chǎn)生相同的黏性末端,將切割下的目的基因與切割后的質(zhì)?;旌?,并加入適量的DNA連接酶,使之形成重組DNA分子(重組質(zhì)粒)
?、蹖⒛康幕?qū)胧荏w細(xì)胞常用的受體細(xì)胞:大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌、動(dòng)植物細(xì)胞
?、苣康幕驒z測(cè)與表達(dá)
檢測(cè)方法如:質(zhì)粒中有抗菌素抗性基因的大腸桿菌細(xì)胞放入到相應(yīng)的抗菌素中,如果正常生長(zhǎng),說明細(xì)胞中含有重組質(zhì)粒。
表達(dá):受體細(xì)胞表現(xiàn)出特定性狀,說明目的基因完成了表達(dá)過程。如:抗蟲棉基因?qū)朊藜?xì)胞后,棉鈴蟲食用棉的葉片時(shí)被殺死;胰島素基因?qū)氪竽c桿菌后能合成出胰島素等。
5.轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性