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Tris是什么?有什么作用?Tris

 志比鴻鵠001 2012-04-06
Tris:三羥甲基氨基甲烷

三羥甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱Tris)是一種有機化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應用于生物化學分子生物學實驗中的緩沖液的制備。例如,在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以與發(fā)生縮合反應
     Tris為弱堿,在室溫(25下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。
Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于Tris的pKa的影響。

      由于Tris緩沖液為弱堿性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質子化,從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。如果將調節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA),而換成硼酸則獲得“TBE緩沖液”(Tris/Borate/EDTA)。這兩種緩沖液通常用于核酸電泳實驗中。

【性能參數(shù)】
  
                                                                     
Cas號 【77-86-1】

MDL:

--MFCD00004679
Beilstein 741883

EINECS:

--201-064-4
分子式 C4H11NO3; NH2C(CH2OH)3
分子量 121.14
別名 緩血酸銨,三(羥甲基)氨基甲烷,2-氨基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇,氨丁三醇,三甲醇氨基甲烷,氨基丁三醇
2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
THAM
Tris base
Tris(hydroxymethyl)aminomethane
Trometamol                    
分子結構式

  性質:該品為
白色結晶或結晶性粉末。水溶液在空氣中不吸收二氧化碳(阿拉丁網(wǎng)站所述),0.1mol/L水溶液pH10.4。對銅、鋁有腐蝕作用。溶解度(:550 g/L水 (25°C),79.1MG/ML 乙二醇,26MG/ML 甲醇 (25°C),22.0MG/ML 95% 乙醇- 14MG/ML DMF (25°C),2.0MG/ML 丙酮,0.5MG/ML 乙酸乙酯(25°C),0.05MG/ML 氯仿,<0.05MG/ML CCL4 (25°C)。
熔點:170℃
沸點:219-220℃(10 mmHg)
  用途:有機合成中間體。在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的PH值。在凝膠中也起到穩(wěn)定PH的作用,只不過是Tris-HCl緩沖體系。

      Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲(C. elegans核纖層蛋白lamin)的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一。此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標準物。


常用Tris-HCl緩沖液配制:   
Tris-HCl(0.05mol/L,25℃)
  50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后,加水稀釋至100ml
  pH           x/ml                     pH                      x/ml
  7.10          45.7                  8.10                   26.2
  7.20          44.7                  8.20                   22.9
  7.30          43.4                  8.30                   19.9
  7.40          42.0                  8.40                   17.2
  7.50          40.3                  8.50                   14.7
  7.60          38.5                  8.60                   12.4
  7.70          36.6                  8.70                   10.3
  7.80          34.5                  8.80                     8.5
  7.90          32.0                  8.90                     7.0


Tris分子量=121.14 ;0.1 mol/L溶液為12.114 g/L。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳(百度及其他網(wǎng)站所述),使用時注意將瓶蓋嚴。配置不同濃度和不同PH值Tris-HCl緩沖液時,可以先配成一定PH值的0.05mol/L緩沖液,再稀釋到所需濃度。

其他Tris-HCl配制

1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)
組份濃度  1 M Tris-HCl
配制量    1L
配制方法  1.稱量121.1 g Tris置于l L燒杯中。
            2.加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。
            3.按下表加入濃HCl量調節(jié)所需要的pH值。
pH值        濃HCl
7.4        約70 ml
7.6        約60 ml
8.0        約42ml
4.將溶液定容至1 L。
5.高溫高壓滅菌后,室溫保存。
注意:應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)         
   組份濃度  1.5 MTris-HCl
配制量    1 L
配制方法  1.稱量181.7 g Tris置于1 L燒杯中。
            2.加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。
            3.用濃HCl調節(jié)pH值至8.8。
            4.將溶液定容至1 L。
            5.高溫高壓滅菌后,室溫保存。
注意:應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。

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