Tris:三羥甲基氨基甲烷 三羥甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為Tris)是一種有機化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。例如,在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以與醛發(fā)生縮合反應 Tris為弱堿,在室溫(25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。 Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于Tris的pKa的影響。 由于Tris緩沖液為弱堿性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質子化,從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。如果將調節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA),而換成硼酸則獲得“TBE緩沖液”(Tris/Borate/EDTA)。這兩種緩沖液通常用于核酸電泳實驗中。 【性能參數(shù)】
性質:該品為白色結晶或結晶性粉末。水溶液在空氣中不吸收二氧化碳(阿拉丁網(wǎng)站所述),0.1mol/L水溶液pH10.4。對銅、鋁有腐蝕作用。溶解度(:550 g/L水 (25°C),79.1MG/ML 乙二醇,26MG/ML 甲醇 (25°C),22.0MG/ML 95% 乙醇- 14MG/ML DMF (25°C),2.0MG/ML 丙酮,0.5MG/ML 乙酸乙酯(25°C),0.05MG/ML 氯仿,<0.05MG/ML CCL4 (25°C)。 熔點:170℃ 沸點:219-220℃(10 mmHg) 用途:有機合成中間體。在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的PH值。在凝膠中也起到穩(wěn)定PH的作用,只不過是Tris-HCl緩沖體系。 Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲(C. elegans核纖層蛋白lamin)的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一。此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標準物。 常用Tris-HCl緩沖液配制: Tris-HCl(0.05mol/L,25℃) 50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后,加水稀釋至100ml pH x/ml pH x/ml 7.10 45.7 8.10 26.2 7.20 44.7 8.20 22.9 7.30 43.4 8.30 19.9 7.40 42.0 8.40 17.2 7.50 40.3 8.50 14.7 7.60 38.5 8.60 12.4 7.70 36.6 8.70 10.3 7.80 34.5 8.80 8.5 7.90 32.0 8.90 7.0 Tris分子量=121.14 ;0.1 mol/L溶液為12.114 g/L。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳(百度及其他網(wǎng)站所述),使用時注意將瓶蓋嚴。配置不同濃度和不同PH值Tris-HCl緩沖液時,可以先配成一定PH值的0.05mol/L緩沖液,再稀釋到所需濃度。 其他Tris-HCl配制 1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0) 組份濃度 1 M Tris-HCl 配制量 1L 配制方法 1.稱量121.1 g Tris置于l L燒杯中。 2.加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。 3.按下表加入濃HCl量調節(jié)所需要的pH值。 pH值 濃HCl 7.4 約70 ml 7.6 約60 ml 8.0 約42ml 4.將溶液定容至1 L。 5.高溫高壓滅菌后,室溫保存。 注意:應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。 1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 組份濃度 1.5 MTris-HCl 配制量 1 L 配制方法 1.稱量181.7 g Tris置于1 L燒杯中。 2.加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。 3.用濃HCl調節(jié)pH值至8.8。 4.將溶液定容至1 L。 5.高溫高壓滅菌后,室溫保存。 注意:應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。 |
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